Perchè si usa?
Il Tryptic Soy Agar, maggiormente noto como TSA, è uno dei terreni di coltura generici più usati nel mondo della Microbiologia e questo sicuramente si deve alla sua capacità di supportare la crescita di un’ampia varietà di microrganismi (batteri, funghi e muffe).
In particolare, il TSA è indicato per l’enumerazione di microrganismi nei prodotti non sterili, secondo le raccomandazioni del metodo armonizzato nelle Farmacopee Statunitense (USP), Europea (EP) e Giapponese (JP).
Grazie alle sue propietà nutrizionali, all’assenza di inibitori ed alla possibilitá di essere supplementato con diversi altri composti, il TSA viene spesso utilizzato per l’isolamento di patogeni, per lo studio di microrganismi a crescita fastidiosa, per il mantenimento di ceppi da collezione e per processi fermentativi.
Come funziona?
Il digerito pancreatico di caseina e quello papaico di semi di soia forniscono aminoacidi, azoto carbonio, minerali, vitamine ed altre sostanze nutrienti per la crescita dei microrganismi.
Allo stesso tempo, il cloruro di sodio facilita il bilancio osmotico del terreno, mentre l’agar viene introdotto come sostanza solidificante per colture su piastre Petri.
Composizione del terreno
- Digerito pancreatico di Caseina 15 g/L
- Digerito Papaico di Semi di Soia 5.0 g/L
- Sodio Cloruro 5.0 g/L
- Agar 15.0 g/L
pH Finale a 7.3 ± 0.2 a 25 °C
Preparazione del terreno
La preparazione del TSA è molto semplice e non richiede altro che combinare gli ingredienti necessari in un flacone a bagnomaria termoregolato a 100 °C.
L’eventuale aggiunta di supplementi nutrizionali al terreno di base, si effettua una volta raffreddato il terreno a 45-50 °C.
Controllo di qualità
Le piastre di TSA vengono incubate con i microrganismi indicati nella tabella seguente, incondizioni aerobiche, a 32 ± 2.5 °C per 18-24 ore (batteri) o a 22.5 ± 2.5 °C fino a 3 giorni (lieviti e muffe).
Risultati della crescita
Microrganismo
Staphilococcus aureus
Escherichia coli
Pseudomonas aeruginosa
Bacillus subtilis
Salmonella Typhimurium
Candida albicans
Aspergillus brasiliensis
Crescita
Buona
Buona
Buona
Buona
Buona
Buona
Buona
Modifiche al terreno
Come abbiamo precedentemente accennato, il TSA si presta bene all’aggiunta dei supplementi nutrizionali più svariati.
Tra questi, il sangue è l’additivo più comune, a concentrazioni variabili tra il 5% e il 15% sotto forma di sangue defibrinato (di coniglio, cavallo, montone, uomo). In questo caso, il colore del terreno, anche dopo l’incubazione, rimane di un rosso vivo dimostrando il mantenimento dell’integrità dei globuli rossi.
Immagini
Figura 3 – Colonie di S. aureus e S. epidermidis in Tryptic Soy Agar
E’ possibile consultare la scheda del Tryptic Soy Agar mediante il nostro podcast.
