ALOA Agar (Agar Listeria acc. To Ottaviani & Agosti)

Perchè si usa l’ALOA Agar?

ALOA Agar è un terreno selettivo differenziale e cromogenico per la determinazione di Listeria monocytogenes e Listeria spp. in campioni alimentari.

Composizione del terreno

Terreno ALOA (g/L)

  • Peptone 18,00
  • Triptone 6,00
  • Estratto di lievito 10,00
  • Sodio Piruvato 2,00
  • Glucosio 2,00
  • Magnesio glicerosolfato 1,00
  • Magnesio solfato 0,50
  • NaCl 5,00
  • LiCl2 10,00
  • Disodio idrogeno fosfato anidro 2,50
  • 5-bromo-4-cloro-3-indolil- β -D-glucopiranoside 0,05
  • Agar 13,5

Enrichment Supplement

  • L- α -Fosfatidilinositolo 0,4g

Selective Supplement

  • Acido nalidissico, sale sodico 0,004g
  • Ceftazidime 0,004g
  • Cicloeximide 0,004g
  • Polimixina B solfato 15340UI

pH finale a 25°C: 7,2±0,2

Come funziona l’ALOA Agar?

L’azione selettiva del terreno è data sia dal Selective Supplement che dal LiCl2. L’azione cromogenica è data dal composto cromogenico X-glucoside, quale substrato per l’evidenziazione dell’enzima b-glucosidasi, comune a tutte le specie di Listeria. L’azione differenziale specifica è ottenuta con un substrato per la fosfolipasi C (PIPLC: phosphatidyl inositol phospholipase C), tipica di L. monocytogenes e di alcuni ceppi di L. ivanovii.

Preparazione del terreno

  • Sospendere 70,6 g in 1 L di acqua distillata fredda;
  • Portare ad ebollizione sotto agitazione;
  • Autoclavare a 121°C per 15 minuti;
  • Raffreddare il terreno fino a 47°-50°C;
  • Aggiungere ALOA Enrichment Supplement preriscaldato a 47-50°C;
  • Aggiungere ALOA Selective Supplement ricostituito con una 5 ml di una miscela etanolo/acqua distillata sterile in rapporto 1:1;
  • Mescolare e distribuire in piastre sterili.

Risultati della crescita su ALOA Agar

BatterioCaratteristiche colonie
L. monocytogenescolonie verdi-azzurre con alone opaco
L. innocuacolonie verdi-azzurre senza alone
L. ivanoviicolonie verdi-azzurre, con o senza alone
E. coliinibito
E. faecalisinibito

Immagini

sempio di crescita di L. monocytogenes (verde azzurre con alone) e di Listeria spp. (verde azzurre senza alone).
Figura 1: Esempio di crescita di L. monocytogenes (verde azzurre con alone) e di Listeria spp. (verde azzurre senza alone).
Crescita di  L. monocytogenes su ALOA Agar
Figura 2 – Crescita di L. monocytogenes su ALOA Agar
Crescita di  L. monocytogenes su ALOA Agar
Figura 3 – Crescita di L. monocytogenes su ALOA Agar

Fonti

Foto dell'autore

Andrea Borsa

Appassionato di parassitologia. Trovo che i parassiti siano spesso poco considerati, perciò cerco di parlarne in modo da farveli vedere sotto una luce diversa.

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