Peptone yeast glucose broth (PYG)

Perché si usa?

Il PYG (Peptone yeast extract-glucose) è un terreno di coltura liquido, non selettivo, utilizzato nella valutazione qualitativa dei prodotti del metabolismo dei batteri anaerobi, nonché delle loro reazioni di fermentazione.

Come funziona?

I peptoni e l’estratto di lievito forniscono nutrienti ai batteri anaerobi, mentre il glucosio è fonte di energia. Il bicarbonato di sodio e l’idrogenofosfato di potassio hanno invece la funzione di tamponi. La cisteina viene aggiunta per mantenere bassa la quantità di ossigeno, mentre l’emina è utile per stimolare il fattore X, che supporta la crescita dei microrganismi. La vitamina K, infine, aiuta la crescita dei batteri anaerobi, in particolare del genere Bacteroides.

Composizione del terreno

Peptoni 20 g
Glucosio 10 g
Estratto di lievito 10 g
Bicarbonato di Sodio 0.4 g
Idrogenofosfato di Potassio 40 mg
Fosfato di Potassio 40 mg
Emina 10 mg
Vitamina K 10 mg
L-cisteina idrocloride 8 mg
Magnesio solfato 8 mg
Acqua demineralizzata 1000 ml

pH 7.1 ± 0.3 a 25 °C

Preparazione del terreno

Miscelare gli ingredienti ed aggiungere 1000 ml d’acqua
Mescolare accuratamente
Riscaldare fino a bollitura
Versare nei tubi ed autoclavare a 121 °C per 15 minuti.

Risultati della crescita

Microrganismo	Incubazione	Crescita
Bacteroides fragilis	In anaerobiosi; 35-37 °C per 48h	Buona
Clostridium prefringens	In anaerobiosi; 35-37 °C per 48h	Buona

Immagini

Flaconi contenenti brodo di coltura Peptone Yeast Glucose (PYG) per batteri anaerobi — *Figura 1 – Flaconi di PYG broth pronto all’uso.*

Limitazioni del terreno

L’identificazione finale dei batteri anaerobi isolati su terreno PYG prevede un’analisi aggiuntiva tramite cromatografia gas-liquido (GLC). Attraverso questa tecnica è possibile individuare il tipo di batterio anaerobio valutando il profilo dei prodotti della fermentazione del glucosio: gli acidi grassi volatili, come l’acido acetico, l’acido propionico e l’acido butirrico e i composti organici non volatili (Figura 2). Generi diversi di batteri producono profili differenti. Dai brodi di coltura si estraggono le cellule batteriche che vengono saponificate per liberare gli acidi grassi, che sono poi sottoposti a cromatografia. I risultati vengono infine confrontati con altri profili in un database apposito che aiuta nell’identificazione.