Utilizzo
Reinforced Clostridial agar è un terreno utilizzato per l’isolamento di batteri anaerobi, in particolar modo per specie appartenenti alla famiglia dei Clostridia, tra questi sono presenti diversi batteri patogeni che sono responsabili di importanti patologie. (Tabella 1)
| Clostridium tetani | Agente eziologico della patologia nota con il nome di tetano |
| Clostridium perfigens | Rappresenta uno dei maggiori responsabili di tossinfezioni alimentari |
Composizione del terreno
Il Reinforced Clostridial agar è composto da:
| Elementi del terreno | Quantità (g/L) | Funzione |
| Estratto di manzo | 10.0 | Fornisce al batterio composti carboniosi, aminoacidi a catena lunga ed altri nutrienti essenziali, in modo particolare i composti azotati |
| Peptone | 10.0 | Fornisce al batterio composti carboniosi, aminoacidi a catena lunga ed altri nutrienti essenziali, in modo particolare i composti azotati |
| Estratto di lievito | 3.0 | Rappresenta un fonte di vitamine in particolare quelle appartenenti al gruppo B |
| Glucosio monoidrato | 5.0 | Fonte di carbonio |
| Amido solubile | 1.0 | Favorisce la germinazione delle spore |
| NaCl (Cloruro di sodio) | 5.0 | Necessario per mantenere l’equilibrio osmotico |
| L- Cisteina | 0.5 | Promuove la crescita dei batteri della famiglia Clostridia |
| Acetato di sodio | 3.0 | L’acetato di sodio agisce come buffer |
| Agar | 15.0 | – |
Preparazione del terreno
Per la preparazione del terreno è necessario:
- Sospendere 52.2 g in un 1 L di acqua distillata;
- Riscaldare e portare ad ebollizione finché il contenuto non sarà totalmente dissolto;
- Sterilizzare in autoclave a 115 °C per 15 minuti;
- Raffreddare a 45 – 50 °C;
- Mescolare bene e versare il contenuto in piastre Petri sterili.
Conservare il terreno in un contenitore ben chiuso ad una temperatura compresa tra i 10 – 30 °C. Una conservazione inadeguata del terreno può portare alla formazione di grumi perciò è necessario che la bottiglia venga chiusa e conservata in luoghi al riparo della luce ad una temperatura compresa tra i 25 – 30 °C.
Risultati di crescita
Le colonie dei batteri che crescono sul terreno Reinforced Clostridial agar, presentano una colorazione opaca e giallastra. (Figura 1)
Immagini
Limitazioni del terreno
Il terreno è utilizzato per l’isolamento di batteri appartenenti alla famiglia Clostridia tuttavia si raccomanda di eseguire ulteriori test biochimici per l’identificazione completa.
Ismael Sanchez Polanco
Fonti
- European Pharmacopoeia 9.0 (2010) 2.6.13. Microbiological examination of non-sterile products: Test for specified microorganisms.
- United States Pharmacopoeia 40-NF 35 (2017) <62> Microbiological examination of non-sterile products: Test for specified microorganisms.
- Japanese Pharmacopoeia 4.05 (2016) Microbiological examination of non-sterile products: Test for specified microorganisms.
