Perché si usa?
Il Sabouraud Dextrose Agar, noto come SDA, è un terreno traslucido e di colore ambrato chiaro che viene utilizzato per l’isolamento, la coltivazione ed il mantenimento di specie non patogene e patogene di funghi e lieviti. Il pH del terreno è circa 5,6, al fine di migliorare la crescita dei funghi, in particolare dei dermatofiti, e di inibire leggermente la crescita batterica nei campioni clinici.
L’SDA è stato formulato da Sabouraud nel 1892 per la coltura di dermatofiti.
Come funziona?
Il Peptone fornisce l’azoto e la fonte di vitamine necessarie per la crescita dell’organismo nel terreno SDA. Il destrosio viene utilizzato come fonte di energia e di carbonio. L’agar è l’agente di solidificazione. Il cloramfenicolo e/o la tetraciclina possono essere aggiunti come antimicrobici ad ampio spettro per inibire la crescita di un’ampia gamma di batteri gram-positivi e gram-negativi. La gentamicina viene aggiunta per inibire ulteriormente la crescita dei batteri gram-negativi.
Composizione del terreno
- Destrosio 40 g/L;
- Peptone 10 g/L;
- Agar 15g/L;
- Acqua distillata 1000 mL
pH finale a 5.6 ± 0.2 a 25 °C
Preparazione del terreno
- Aggiungere tutti gli ingredienti in ~ 900 ml di acqua deioinizzata;
- Regolare il pH ad un valore di 5,6 con acido cloridrico e regolare il volume finale a 1 litro;
- Riscaldare fino a raggiungere l’ebollizione per sciogliere completamente il terreno;
- Autoclavare a 121 ºC per 15 minuti;
- Raffreddare a ~ 45 / 50 °C e versare in piastre di Petri.
Risultati della crescita
| Microrganismo | Morfologia della colonia |
| Aspergillus flavus | Colonia giallo-verde |
| Aspergillus niger | La crescita iniziale della colonia è bianca, diventa poi progressivamente nera |
| Rhodotorula | Colonie color crema-arancio-giallastro |
| Aspergillus fumigatus | Colonia blu-verde |
| Aspergillus nidulans | Colonia blu-verdastro con bordo biancastro |
| Candida albicans | Colonie color crema (Figura 1 A) |
Immagini
Limitazioni del terreno
- Alcuni ceppi possono crescere male o per nulla in questo terreno;
- Gli agenti antimicrobici aggiuntivi per inibire i batteri possono anche inibire certi funghi patogeni;
- Si raccomanda di eseguire test biochimici, immunologici, molecolari o di spettrometria di massa su colonie provenienti da colture pure per una completa identificazione;
- L’SDA non è un terreno d’elezione per promuovere la crescita di alcuni funghi filamentosi;
- La crescita in SDA deve essere accompagnata con una crescita parallela in un terreno selettivo per un’identificazione corretta.
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