Brodo di Todd Hewitt

Perché si usa?

Il brodo di Todd Hewitt è usato per la crescita selettiva di streptococchi beta-emolitici per l’utilizzo in test sierologici, soprattutto da campioni provenienti dall’apparato genitale.

Gli streptococchi di gruppo B sono cocchi gram positivi, anaerobi facoltativi. La loro ricerca è di grande interesse in ambito clinico poiché possono recare gravi infezioni nel neonato, entro la prima settimana di vita.

L’infezione viene trasmessa per via verticale attraverso il canale del parto; da qui la necessità di eseguire appositi test da campioni clinici provenienti dall’apparato genitale femminile.


Una variante prevede l’utilizzo di antibiotici (gentamicina e acido nalidixico), per l’arricchimento selettivo degli streptococchi di gruppo B (Streptococcus agalactiae).

Composizione del terreno

Il brodo di Todd Hewitt con Gentamicina e acido nalidixico è caratterizzato dalla seguente composizione:

  • Cuore, infuso 3,1 g 
  • Peptone 20,0 g 
  • Destrosio 2,0 g 
  • Cloruro di sodio 2,0 g 
  • Fosfato sodico 0,4 g 
  • Carbonato di sodio 2,5 g

  • Gentamicina 8 mg
  • Acido nalidixico 15 mg

    pH (20-25°C) 7,8 ± 0,2

Come funziona?

Il brodo Todd Hewitt viene impiegato per la coltivazione di streptococchi β-emolitici, soprattutto per studi sierologici. Il terreno è molto nutritivo, per la presenza di peptoni, destrosio e sali. Il destrosio stimola la produzione di emolisina. Fosfato e carbonato di sodio, invece, fanno da soluzione tampone contro l’acidità derivata dalla fermentazione del destrosio, proteggendo così l’emolisina dall’inattivazione acida.

Inoltre, la gentamicina e l’acido nalidixico possono essere introdotti opzionalmente nel terreno; questi portano alla natura selettiva dello stesso verso gli streptococchi del gruppo B.

Preparazione del terreno

  • Sospendere 36,4 g di polvere in 1000 mL di acqua purificata fredda.
  • Portare ad ebollizione sotto agitazione.
  • Distribuire in provette ed autoclavare a 121°C per 15 minuti.

    A seconda dell’utilizzo, infine:
  • Porre 10 mL nel flacone per uso generale, 3 mL per il test di tipizzazione sierologica, 1 mL per il test con anticorpi fluorescenti.

Risultati della crescita

La crescita nel brodo è indicata dalla presenza di torbidità rispetto al controllo non inoculato.

BatterioRisultato della crescita
Streptococcus pyogenesCrescita, torbidità.
Streptococcus pneumoniaeCrescita, torbidità.
Streptococcus agalactiaeCrescita, torbidità.

Immagini

Figura 1 – Brodo di Todd Hewitt in flacone pronto all’uso [Fonte: termofisher.com]

Controllo negativo di brodo di todd hewitt sulla sinistra. A destra, la torbidità indica un campione positivo.
Figura 2 – Brodo di Todd Hewitt; a destra, si nota l’aspetto tobido ad indicare la positività da S. agalactiae

Limitazioni all’utilizzo del terreno

L’identificazione finale è possibile solamente dopo appositi test sierologici, morfologici o biochimici.

Davide Ghisi

Fonti

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