Buffered Charcoal Yeast Extract (BCYE) Agar

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Perchè si usa?

Il terreno BCYE viene utilizzato per l’isolamento e la crescita di Legionella pneumophila e altre specie di Legionella da campioni di varia natura.

Come funziona?

L’estratto di lievito funge da fonte di carbonio, aminoacidi, vitamine e minerali necessari alla crescita di Legionella spp.. L’aminoacido L-cisteina, il pirofosfato ferrico e l’α-chetoglutarato soddisfano il fabbisogno e stimolano la crescita del batterio. Il carbone attivo è utile per decomporre il H₂O₂(sostanza tossica per Legionella), mentre il tampone ACES (acronimo di acido N-(2-Acetamido)-2-aminoetansulfonico) e il KOH mantiene il pH nel range ottimale. L’aggiunta di antibiotici, utili all’inibizione di altri batteri eventualmente presenti in campioni d’acqua e clinici, rende il BCYE selettivo. Avremo così il MWY (Wadosky – Yee Medium) e il GVPC. Entrambi contenenti glicina, polimixina B e vancomicina, si differenziano perchè il primo contiene anche Blu di Bromotimolo e il bromocresolo porpora, mentre il secondo contiene o cicloeximide (un antimicotico, ma fortemente tossico) o natamicina (anch’esso un antimicotico ma meno tossico).

Composizione del terreno (BCYE base)

– Estratto di lievito 10 g/L
– HCl – cisteina 0,4 g/L
– Pirofosfato di ferro 0,25 g/L
– Tampone ACES 10 g/L
– KOH 2,8 g/L
– Carbone attivo 2 g/L
– α-chetoglutarato 1 g/L
– Agar 15 g/L

pH 6,9±0.1 a 25°C

MWY
– Glicina 3 g/L
– Polimixina B 6,4 mg/L
– Vancomicina 1 mg/L
– Natamicina 200 mg/L
– Bromotimolo blu 10mg/L
– Bromocresolo porpora 10 mg/L

BMPA
– Cefamandolo 4 mg/L
– Polimixina B 10,2 mg/L
– Natamicina/Cicloeximide 200 mg/L

GVPC
– Glicina 3 mg/L
– Vancomicina 1 mg/L
– Polimixina B 80.000 UI
– Cicloexidina/ Natamicina 80 mg

Risultati della crescita

	Legionella pneumophila	Legionella bozemanii	Legionella micdadei	Legionella dumoffii	Legionella gormanii	Legionella lonbeachae	Legionella jordanis
Crescita	+	+	+	+	+	+	+
Fluorescenza a 366nm	–	+	–	+	+	–	–
Ossidasi	±	–	+	–	–	+	+
Catalasi	+	+	+	+	+	+	+
Ureasi	–	–	–	–	–	–	–
Gelatinasi	+	+	–	+	+	+	+
b-lattamasi	+	±	–	+	+	±	+
Idrolisi ippurato	+	–	–	–	–	–	–